Возбудитель — факультативные анаэробы, умеренные психрофилы. Хорошо растут на простых питательных средах при рН 7,0—7,2 и температуре 28 °C. Возможен рост и при более низких температурах (до 5°С), что помогает выделить микроб из загрязненного патологического материала.
При росте в жидких средах образуются пленка с отходящими от нее нитями и хлопьевидный осадок.
Развитие колоний на плотных средах проходит через три стадии: через 10−12 часов под микроскопом рост в виде бесцветных пластинок (стадия «битого стекла»); через 18−24 часа — стадия «кружевных платочков», при микроскопировании заметна светлая кружевная зона, расположенная вокруг выступающей центральной части, желтоватой или слегка буроватой окраски. Через 40−48 часов наступает стадия «взрослой колонии» — буровато-очерченный центр с выраженной периферической зоной. Yersiniapseudotuberculosis и Yersiniaenterocolitica стадии «битого стекла» не имеют.
На средах с кровью колонии Yersinia pestis зернистые со слабо выраженной периферической зоной.
С целью быстрейшего получения характерного для Yersinia pestis роста на средах к ним рекомендуется добавлять стимуляторы роста: сульфит натрия, кровь (или ее препараты) или лизат культуры сарцины. Палочке чумы свойствен выраженный полиморфизм, особенно на средах с повышенной концентрацией NaCl, в старых культурах, в органах разложившихся чумных трупов.