Методы качественного анализ сырья, содержащего сапонины

Для обнаружения сапонинов в растительном сырье пользуются реакциями, основанными на трех основных свойствах: физических, биологических и химических.

Для качественных реакций готовят водное извлечение (1:10), нагревая измельченное растительное сырье на водяной бане в течение 10−15 минут. Настой после охлаждения фильтруют и проводят с ним необходимые реакции[7].

Реакция гемолиза. Готовят извлечение на изотоническом растворе натрия хлорида 1: 30 настаиванием на кипящей водяной бане в течение 30 минут. К 2 мл извлечения добавляют 2 мл 2% взвеси дефибринированной крови. В присутствии сапонинов образуется прозрачный красный раствор («лаковая кровь»)[8].

Реакция пенообразования. Водное извлечение из сырья (1: 10) встряхивают в пробирке в течение 15 сек. Не исчезающая в течение 15 мин пена говорит о возможном присутствии сапонинов.

Хроматография в тонком слое. Водное или спиртовое извлечение хроматографируют на силикагеле или алюминия оксиде в подходящей системе растворителей. Для нейтральных сапонинов чаще всего используют н-бутанол — уксусная кислота — вода, для кислых — н-бутанол — водный аммиак в различных соотношениях. Систему подбирают экспериментально. На хроматограммах сапонины обнароуживают, проявляя различными кислотными реагентами: конц. Кислота серная, уксусный ангидрид, 25% раствор фосфорномолибденовой кислоты, треххлористая сурьма и др., часто в сочетании с кобальта хлоридом, ванилином, пара-диметиламинобензальдегидом и др[8].

Тритерпеновые сапонины проявляются в виде красноватоили буроватофиолетовых пятен.

Стероидные сапонины при проявлении хроматограмм 1% раствором сурьмы треххлористой, конц. кислотой серной и уксусным ангидридом образуют желтые (спиростановые) пятна (реакция Санье). В настоящее время хроматографический метод дает наиболее достоверное представление о наличии сапонинов в сырье[8].

Реакция Лафона. К 2 мл спиртового извлечения добавляют 1 мл кислоты серной концентрированной, 1 мл этанола и 1 каплю 10% раствора железа сульфата. В присутствии сапонинов образуется сине-зеленое окрашивание.

При добавлении к 2 мл водного извлечения 1 мл 10% раствора натрия нитрата и 1 капли кислоты серной концентрированной образуется кроваво-красное окрашивание.

При добавлении к 2 мл спиртового извлечения 1% раствора холестерина образуется белый осадок[9].