В данной главе приводятся результаты исследований сезонных вариаций суточных ритмов сократительной функции сердца и сосудистого тонуса интактных кроликов непараметрическими методами математической статистики.
Экспериментальные материалы, использованные для анализа, охватывают исследования за период 1984;1985 гг. и получены на 480 кроликах при условиях эксперимента и методами, описанными в Главе 2.
Исследования проводились 21−23 июня 1984 г, 21−23 сентября 1984 г, 21−23 декабря 1984 г и 21−23 марта 1985 г.
Следует подчеркнуть, что для анализа сезонных зависимостей использовались также и показатели активности лизосомных ферментов печени кроликов.
У кроликов после регистрации функциональных показателей производили экстирпацию печени, помещали в ледяной буферный раствор для гомогенизации следующего состава: 0.33 М сахароза (х. ч), 1 мМ ЭДТА (Serva, ФРГ), 3.8 мМ триэтаноламин рН 7.25.
При температуре 0−4°С печень отмывали, очищали от соединительной ткани, измельчали ножницами и гомогенизировали в стеклянном гомогенизаторе Поттера-Эвелгейма с тефлоновым пестиком (зазор- 0.21 мм) в течение 180с при 40 об/с. Гомогенат 1:10 подвергали дифференциальному центрифугированию (Ruth, 1978) на ультрацентрифуге L8-M фирмы «Beckman» (CШA). Получали лизосомный супернатант (надосадочная жидкость) и обогащенную лизосомами фракцию (осадок), которую ресуспендировали 1:5 в буферном растворе 0.7 М сахарозы, 1 мМ ЭДТА (Serva, ФРГ), рН = 7.0. О структурной целостности лизосом судили по величине активности лизосомных ферментов в различных фракциях.
Изучаемые активности лизосомных ферментов.
- 1. Активность ферментов, определяемая в супернатанте, обозначалась как свободная или неседиментируемая активность — NSA.
- 2. Активность ферментов, определяемая в обогащенном лизосомном осадке и доступная для субстрата, характеризовалась как доступная активность — EA.
- 3. После дезинтеграции мембран лизосом методом замораживания и оттаивания (С. Buya et al., 1978) определялась общая активность — CA.
