Материалы и методы

Ростстимулирующая и протекторная активность внеклеточных полисахаридов выделенных из культуры клеток пшеницы была изучена с использованием культур огурца. Для изучения протекторной активности в лабораторных условиях внеклеточных полисахаридов предварительно поставлены эксперименты по определению сублетальной концентрации стресс-факторов (NaCl). Для этого семена огурцов стерилизовали раствором КМnO4 в концентрации 0,05 мг/мл (в течение 5 мин), после чего помещали по 10 шт. в чашки Петри на фильтровальную бумагу, смоченную растворами, содержащими различные концентрации NaCl (0,25%; 0,5%; 0,75%; 1,0%; 1,25%; 1,5%; 1,68%; 2,0%;2,5%; 3,0% и 3,5%) для создания эффекта засоления. В ходе проращивания в течение 5 дней вели наблюдения за энергией прорастания семян, подсчитывали процент проросших семян и измеряли длину побегов и корней. В качестве контроля служили варианты проращивания семян на воде без добавления NaCl. В качестве сублетальных доз отбирали те концентрации, в которых под действием стрессового агента погибло более 50% и менее 100% проращиваемых семян. Концентрации стресс агентов, вызывающие 100%-ую гибель семян отбирали как летальные дозы. Определены сублетальные дозы стресс фактора (соли) для огурцов (таблицы 1). В результате для огурца определена сублетальная доза — NaCl 1,0%.

В ходе проращивания вели наблюдения за энергией прорастания семян, подсчитывали процент проросших семян и измеряли длину побегов и корней. В качестве контроля служили семена, замоченные в воде без ПС. Для изучения протекторной активности в лабораторных условиях внеклеточных полисахаридов для (огурца)предварительно поставлены эксперименты по определению сублетальной концентрации стресс-факторов солевого и осмотического стрессов, создаваемых различными концентрациями NaCl. Для культур огурца была определена своя специфическая сублетальная доза, что связано с тем, что устойчивость к стрессовым факторам не одинакова. После определения сублетальных доз стрессовых агентов семена, предварительно замоченные в растворах различных фракций ПС (0,1, 0,01, 0,001и 0,0001 мкг/мл) в течение разного периода времени (4 ч., 24 ч.), проращивали в растворах с сублетальными концентрациями NaCl (эффект засоления). В течение 5 дней наблюдали за всхожестью, энергией прорастания семян, ростом и развитием побегов. В качестве контроля служили семена без замачивания (контроль 1) и семена, замоченные в воде без ПС (контроль 2). Протекторный эффект отмечали у тех концентраций ПС с соответствующим временем замачивания (предобработка), при которых происходила стимуляция всхожести семян и роста проростков в присутствии сублетальной дозы стрессового агента по сравнению с контролем 1 (без замачивания в воде и ПС) и контролем 2 (замачивание семян в воде без ПС). Статистическую обработку данных проводили по общепринятым методам [7, 8] с использованием программы Excel.