Цветные реакции на аминокислоты и белки

Методы исследования органических соединений. Биологически важные классы полии гетерофункциональных соединений. Химия аминокислот и пептидов.

Нингидриновая реакция.

Описание работы:

Белки, полипептиды и свободные б-аминокислоты дают синее или фиолетовое окрашивание с нингидрином. Нингидрин, являясь сильным окислителем, при нагревании вызывает окислительное дезаминирование б-аминокислоты, приводящее к образованию аммиака, двуокиси углерода, соответствующего альдегида и восстановленной формы нингидрина. Восстановленный нингидрин связывается со второй молекулой нингидрина посредством молекулы аммиака с образованием продуктов конденсации, окрашенных в синий, фиолетовый, красный, а в случае пролина — в желтый цвет (пурпур Руэмана), поскольку пролин — иминокислота, аминогруппа которой включена в состав гетероцикла.

Реакция идет по схеме:

Реакция с нингидрином используется для визуального обнаружения б-аминокислот на хроматограммах и для колориметрического определения концентрации аминокислот по интенсивности окраски продукта реакции. Данная реакция не специфична, так как ее дают некоторые амины и амиды кислот.

Оборудование и химреактивы:

Пробирки, штативы, пипетки, спиртовка, пробиркодержатели.

0,1% водный раствор нингидрина.

Исследуемый материал:

• 1% растворы белков (овальбумин, зеин, желатин).
• 1% растворы аминокислот (аргинин, пролин).

Ход работы:

• 1. В пробирки налить по 1 мл 1% растворов белков (зеина, овальбумина, желатина) и аминокислот (аргинина и пролина) согласно схеме в таблице 1.
• 2. К растворам белков и аминокислот прилить по 0,5 мл 0,1% водного раствора нингидрина.
• 3. Пробирки прогреть на спиртовке.

Таблица 1 Инкубационные смеси

Оформление работы:

Результаты опыта перенести в таблицу 2.

Таблица 2 Результаты опыта