Валидационная оценка методики анализа кислоты аскорбиновой в растворе йодатометрическим методом по показателю «Правильность»

Правильностью аналитической методики называется степень близости экспериментальных результатов к истинному значению во всей области измерений. Главным фактором, определяющим правильность, является значение систематической погрешности.

Согласно рекомендациям ICH необходимо проанализировать не менее 9 образцов на 3 уровнях концентраций. Правильность методики устанавливается в указанном диапазоне ее применения. Для оценки полученных результатов наиболее простым и наглядным критерием служит открываемость ®, которая вычисляется по формуле:

При проведении анализа будут получены 9 значений открываемости.

Для более детальной оценки следует статистически обработать полученные значения R, рассчитав стандартное (SD), относительное стандартное отклонение (RSD) и коэффициент Стьюдента по формуле:

где — истинное значение определяемой величины;

— среднее значение определяемой величины;

m — объем выборки;

SD — стандартное отклонение Для тестирования методики на правильность готовили три модельные смеси из разных навесок с точным содержанием каждого из компонентов, включая и вспомогательные вещества (таблица 3).

Таблица 3 Приготовление модельных растворов кислоты аскорбиновой.

Раствор А₁ (модельная смесь 1) Точные навески кислоты аскорбиновой (4,0.

г), трилона Б (0,02г), натрия гидрокарбоната (1,908г) и натрия сульфита (0,16 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Раствор А₂ (модельная смесь 2) Точные навески кислоты аскорбиновой (5,0 г), трилона Б (0,025 г), натрия гидрокарбоната (2,385 г) и натрия сульфита (0,200 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Раствор А₃ (модельная смесь 3) Точные навески кислоты аскорбиновой (6,0 г), трилона Б (0,03 г), натрия гидрокарбоната (2,862г) и натрия сульфита (0,24г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Проводят 3 параллельных титрования на трех уровнях концентраций (9 определений) по следующей методике количественного определения:

К 1 мл каждой из модельных смесей (А_1, А_2, А₃) прибавляют 5 мл воды, 0,15 мл 1% раствора формальдегида, 2 мл 2% раствора кислоты хлороводородной, 0,5 мл 1% раствора калия йодида, 2 мл крахмала и тируют 0,0167 моль/л раствором йодата калия до появления светло-синего окрашивания, не исчезающего в течение 30 сек.

1 мл 0,0167 М раствора калия йодата соответствует 0,8 824 г кислоты аскорбиновой.

Расчет содержания кислоты аскорбиновой (г/мл) проводят по формуле:

где: Vобъем титранта, мл;

Кпоправочный коэффициент;

Ттитр калия йодата по определяемому веществу, г/мл;

а — навеска модельной смеси, взятая на анализ, мл.

Результаты занесли в таблицу № 4 и рассчитали открываемость, стандартное отклонение, относительное стандартное отклонение и коэффициент Стьюдента.

Таблица 4 Результаты определения правильности методом йодатометрии.

№ п/п.	Уров.	Взято модельной смеси, (г или мл).	Взято лекарственного вещества, г.	Объем титранта, мл.	Найдено лекарств. вещества, г.	Открыв.	Метрологические характеристики.
		1,0 мл.	0,04.	4,9.	0,0406.	101,4.	=100,4. SD=1,913. RSD=1,27. t=0.94.
		1,0 мл.	0,04.	5,8.	0,0474.	102,3.
		1,0 мл.	0,04.	5,0.	0,0412.	103,5.
		1,0 мл.	0,05.	5,7.	0,0498.	99,6.
		1,0 мл.	0,05.	5,9.	0,0488.	97,7.
		1,0 мл.	0,05.	6,1.	0,0502.	100,4.
		1,0 мл.	0,06.	7,4.	0,0607.	101,6.
		1,0 мл.	0,06.	7,2.	0,0590.	98,4.
		1,0 мл.	0,06.	7,2.	0,0595.	99,1.

Т.о. должно находиться в пределах от 98 до 102, следовательно, данная методика соответствует валидационной характеристике «правильность».

Поскольку t =0,94 << (95%, f) =2,31, что позволяет считать результаты выборки результатов свободными от систематической ошибки.