Бакалавр
Дипломные и курсовые на заказ

Культивирование эфедры односемянной (Ephedra monosperma) в условиях in vitro и получение биологически активных веществ на ее основе

Диссертация: Культивирование эфедры односемянной (Ephedra monosperma) в условиях in vitro и получение биологически активных веществ на ее основе
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В настоящее время для создания рентабельного производства на основе клеточных культур цена продукта должна быть достаточно высокой. В перспективе, при увеличении продуктивности клеточных штаммов и создании технологий, позволяющих увеличить количество продукта и уменьшить время его наработки, клетки растений могут выступать как конкуренты микроорганизмов в синтезе незаменимых аминокислот… Читать ещё >

Содержание

  • 1. Аналитический обзор
    • 1. 1. Характеристика семейств эфедровые {Ephedraceae)
    • 1. 2. Культура клеток и тканей растений — источник биологически активных соединений
    • 1. 3. Каллусная ткань в изолированной культуре
    • 1. 4. Вторичный метаболизм в растениях in vivo и in vitro
      • 1. 4. 1. Физико-химические факторы среды
      • 1. 4. 2. Способы культивирования и их влияние на вторичный синтез в культуре ткани
  • 2. Методическая часть
    • 2. 1. Объект исследования
    • 2. 2. Исследование химического состава интактного растения Ephedra monosperma
    • 2. 3. Определение влажности
    • 2. 4. Определение суммарного содержания алкалоидов
    • 2. 5. Количественное определение L-эфедрина
    • 2. 6. Определение флавоноидов
    • 2. 7. Определение сапонинов
    • 2. 8. Количественное определение витаминов
    • 2. 9. Определение содержания хлорофилла АиБ
    • 2. 10. Разделение липидов на силикагеле
    • 2. 11. Спектрометрическое определение содержания белка
    • 2. 12. Определение минеральных компонентов
    • 2. 13. Определение легко- и трудногидролизуемых полисахаридов
    • 2. 14. Определение содержания лигнина
    • 2. 15. Определение экстрактивных веществ
    • 2. 16. Определение L-эфедрина в интактном растении и клеточной биомассе методом ГХ/МС
    • 2. 17. Определение L-эфедрина в интактном растении и клеточной биомассе методом ИК спектров
    • 2. 18. Определение содержания жирных кислот
    • 2. 19. Получение каллусных тканей Ephedra monosperma
    • 2. 20. Статистическая обработка результатов эксперимента
  • 3. Экспериментальная часть
    • 3. 1. Химический состав Ephedra monosperma
    • 3. 2. Культивирование Ephedra monosperma в условиях in vitro
      • 3. 2. 1. Получение интактных стерильных растений и введение в культуру in vitro
      • 3. 2. 2. Влияние регуляторов роста на каллусогенез Ephedra monosperma
      • 3. 2. 3. Влияние способа культивирования на рост каллусной ткани Ephedra monosperma
  • 4. Получение алкалоидов из каллусной ткани Ephedra monosperma
  • Выводы
  • Список используемых источников

Культивирование эфедры односемянной (Ephedra monosperma) в условиях in vitro и получение биологически активных веществ на ее основе (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

В последнее время проблемы охраны окружающей среды и её рационального использования стали предметом серьёзных научных исследований и неотъемлемой стороной организации современного производства.

Традиционно биологически активные вещества растений получают на основе использования природного сырья. Зачастую используют биомассу дикорастущих лекарственных растений, часть получают с полей специализированных хозяйств, где растения культивируют, повышают урожайность различными мероприятиями и собирают механическим способом. Широкое использование растений, для получения биологически активных веществ, привело к стремительному сокращению их в природе. Некоторые из них относятся к редким и исчезающим видам, многие растения долго восстанавливают свои площади произрастания.

Поэтому для получения > и сохранения растений — источника биологически активных веществ, кроме традиционных методов, таких как интродукция, организация заповедников, заказников, создание плантаций, существуют иные методы. Одним из них является культура клеток и тканей высших растений in vitro.

Препараты из растений по сравнению с синтетическими лекарствами имеют ряд преимуществ. Будучи сложными, по составу, они содержат много ингредиентов, которые придают им ценные свойства и обеспечивают многостороннее действие на организм, более сильное, чем действие каждого в отдельности. Культура клеток и тканей высших растений является нетрадиционным методом охраны лекарственных растений, сохранения ценного генофонда древесных и травянистых растительных форм, методом получения, оздоровления, возобновления и размножения растений за счёт круглогодичного продуцирования регенерантов и массового выхода посадочного материала путём клонального микроразмножения [1].

В настоящее время для создания рентабельного производства на основе клеточных культур цена продукта должна быть достаточно высокой. В перспективе, при увеличении продуктивности клеточных штаммов и создании технологий, позволяющих увеличить количество продукта и уменьшить время его наработки, клетки растений могут выступать как конкуренты микроорганизмов в синтезе незаменимых аминокислот, некоторых ценных растительных белков, витаминов и других веществ [2,15].

В связи с этим культивирование тканей и клеток высших растений in vitro (в частности Ephedra monosperma) с целью их промышленного использования для получения соединений специализированного обмена и сохранение генофонда определяет актуальность данного исследования.

Выводы.

1 Впервые подобраны условия для введения в культуру in vitro Ephedra monosperma и получена высокопродуктивная каллусная культура Ephedra monosperma из дикорастущего растения-донора, характеризующаяся стабильностью роста. Установлено, что модифицированная питательная среда с минеральной основой по Murashige and Skoog наилучшим образом обеспечивает процессы жизнедеятельности эксплантов Ephedra monosperma и накопление биологически активных веществ в каллусной ткани.

2 Установлено, что гормональный состав среды влияет на накопление клеточной биомассы Ephedra monosperma и количество алкалоидов в ней.

3 Определено, что каллусная ткань по сравнению с молодыми побегами интактного растения содержит большее количество алкалоидов, практически в 2 раза превышающее таковое в интактном растении, а также витамина Си В] (в 1,2 раза).

4 Установлено, что наибольшее количество алкалоидов (2,20%) содержится в каллусной ткани, выращенной на пенополиуретановых подложках.

5 Предложена технологическая схема получения алкалоидов из каллусной ткани Ephedra monosperma и проведена оценка экономической эффективности получения алкалоидов из клеточной культуры Ephedra monosperma.

Предприятие является рентабельным, чистая прибыль составляет 3490,82 тыс. руб. Срок окупаемости — 2,5 года.

Показать весь текст

Список литературы

  1. , Г. П. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия/ Г. П. Яковлева, К. Ф. Блиновой. СПб.: СпецЛит, 2004.- 289 с.
  2. . В. С. Популярный атлас-определитель. Дикорастущие растения / B.C. Новиков, И. А. Губанов. М.: Дрофа, 2004. — 518 с.
  3. , М.С. Биологический энциклопедический словарь / М. С. Гиляров, А. А. Баев, Г. А. Заварзин. М.: Наука, 1989. — 465 с.
  4. , Г. И. Лесная энциклопедия / Г. И. Воробьев, Н. А. Ану-чин, В. Г. Атрохин М.: Наука, 1986. — 350с.
  5. , Б. Н. Ядовитые животные и растения СССР: Справочное пособие для студентов вузов по спец. «Биология» / Б. Н. Орлов, Д. Б. Гелашвили, А. К. Ибрагимов. М.: Высш. шк., 1990.
  6. , В. Г. Лекарственные растения Сибири / В. Г. Минаева. -Новосибирск: Наука, 1970. 270 с.
  7. , А. П. Химия алкалоидов / А. П. Орехов. М.: Химия, 1975.- 672 с.
  8. , М. Ж. Химия эфедриновых алкалоидов / М. Ж. Журинов.- Алма-Ата: Наука, 1990. 140 с.
  9. , М. В. Синтетические фармацевтические препараты / М. В. Рубцов, А. Г. Байчиков. М.: Медицина, 1971. — 320 с.
  10. , А. А. Алкалоиды и их производные как инструмент для изучения холиэнергетической системы / А. А Абдувахабов. — М.: Ме-децина, 1976.- 209 с.
  11. , И. И. Органическая химия / И. И. Грандберг. -М.: Высш. Шк., 1987.- 480 с.
  12. , Г. Б. Метаболизм алкалоидов: регуляция на молекулярном уровне, пространственная организация / Г. Б. Бузук, М. Я. Ловкова // Прикладная биохимия и микробиология. 1995. — Т.31. С. 467−479
  13. , Р. Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений / Р. Г. Бутенко. М.: Наука, 1964. — 272 с.
  14. , Р. Г. Культура тканей и клеток растений / Р. Г. Бутенко. М.: Знание, 1971.-46 с.
  15. , Р.Г. Культура изолированных клеток и тканей в решении задач физиологии растений / Р. Г. Бутенко // Новые направления в физиологии растений. М.: Наука, 1985.- С. 270.
  16. Р.Г. Клеточные технологии для получения экономически важных веществ растительного происхождения / Р. Г. Бутенко // Культура клеток растений и биотехнология. М.: Наука, 1986. — С. 3 -28.
  17. , Г. П. Биотехнология растений: культура клеток / Г. П. Болвелл, К. Р. Вуд., Р. А. Гонзалес.- М.: Агропромиздат, 1989. 280 с.
  18. , П. Иммобилизованные растительные клетки: методы получения и способность к биосинтезу / П. Броделиус // Иммобилизованные клетки и ферменты. М.: Мир, 1988.- С. 156−176.
  19. , А. Г. Культура ткани раувольфии змеиной как продуцент алкалоидов / А. Г. Воллосович, Р. Г. Бутенко // Культура изолированных органов, тканей и клеток растений. М.: Наука, 1981.- С.235−257.
  20. , Е. Ф. К вопросу о природе фактора кондиционирования при изолированной культуре растительных клеток / Е. Ф. Высоцкая, К. 3. Гамбург // Физиология растений. -1975. Т.22. — №.1. — С.63−69.
  21. , Ю. Ю. Клеточная инженерия растений / Ю. Ю. Глеба, К. М. Сытник. Киев: Наукова думка, 1984.- 160с.
  22. , Ю.Ю. Биотехнология растений / Ю. Ю. Глеба // Тез.докл. VII Международной конференции «Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда». —М.: Наука, 1997. С. 6−7.
  23. , Р. Г. Экспериментальный морфогенез в культуре клеток растений. / Р. Г. Бутенко. М.: Наука, 1975.-87 с.
  24. Бич, Г. Биотехнология. Принципы и применение / Г. Бич, Д. Бесг, К Брай-ерли. Пер. с англ. Под ред. И. Хиггинса- М.: Мир, 1988. 480 с.
  25. , А. Г. Культура ткани раувольфии змеиной как продуцент алкалоидов / А. Г. Воллосович, Р. Г. Бутенко // Культура изолированных органов, тканей и клеток растений. М.: Наука, 1981. — С. 235−257.у
  26. , Е.Ф. К вопросу о природе фактора кондиционирования при изолированной культуре растительных клеток / Е. Ф. Высоцкая, К. З. Гамбург // Физиология растений. 1975. — Т.22. — С. 63−69.
  27. , Н. А. Исследование ростовых и биосинтетических способностей длительнопассируемой суспензионной культуры женьшеня / Н. А. Константинова, Г. В. Зайцева, В. С. Фаустов, //Биотехнология М.: Наука 1989. -№ 5. -С. 571−575.
  28. , В. А. Геномная изменчивость соматических клеток растений, каллу сообразован ие in vitro / В. А. Кунах // Биоцолимеры и клетка М.: Наука 1997. -Т. 13.- № 5. С.362−371
  29. , М. Вторичный метаболизм у микроорганизмов, растений и животных. / М. Лукнер. М.: Мир. 1995. — 548 с.
  30. , Т. Иммобилизованные растительные клетки некоторые аспекты их непрерывного культивирования / Т. Масек, Т. Ванек, И. Бениш // Труды 16-й конф". — М.: Наука, 1984. — № 2.- С. 313−316.
  31. , М. Д. Лекарственные средства. / М. Д. Машковский. -М.: Медицина, 1986.-Т.2.-576 с.
  32. Ментел, С. Т. Факгоры культивирования, влияющие на накопление вторичных метаболитов в культуре клеток и тканей растений / С. Т. Ментел,
  33. Т. Смит // Биотехнология сельскохозяйственных растений. М.: Агропромиздат, 1987.-С. 154−198.
  34. , Г. С. Основы химической регуляции роста и продуктивности растений. / Г. С. Муромцев, Д. И. Чекаников, О. Н. Кулаева. М.: Агропромиздат, 1987. — С. 316−322.
  35. , Н. А. Выращивание биомассы ткани женьшеня с применением поддерживающего субстрата /НА. Мясоедов, Р. Г. Бутенко, JI. Н Слешш // Растительные ресурсы. 1986. — Т.З.- С. 314−344.
  36. , П. Образование продуктов вторичного метаболизма в суспензионных культурах клеток. / П. Моррис М.: Агропрмиздат, 1987.-С. 154−203.
  37. , А.М. Регуляция синтеза вторичных соединений в культуре клеток растений / А. М. Носов // Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. М.: Наука, 1991. — С. 5−20.
  38. , Я.В. Биологическая роль микроэлементов и их применение в сельском хозяйстве и медицине. / Я. В. Пейве. М.: Наука, 1974.-438 с.
  39. , А. М.Физиологическая регуляция синтеза стероидов культурой клеток диоскореи дельтовидной / А. М. Носов, В. Н. Пауков, Р. Г. Бутенко // Культура клеток растений и биотехнология. М.: Наука, 1986. — С. 76 -79.
  40. , А.М. Функции вторичных метаболитов растений in vivo и in vitro / А. М. Носов // Физиология растений. 1994. — Т.41. -№ 6. — С. 876 — 878.
  41. , Ю. Г. Вопросы производства лекарственных средств растительного происхождения / Ю. Г. Попов, М. А. Саркисова // ВНИИ систем, упр., экон. исслед. и НТИ. М.: Наука, 1989.- С. 1−27.
  42. , Г. А. Сравнение разных методов для оценки жизнеспособности клеток суспензионных и каллусных кулыур / Г. А. Самыгин, Л. А. Волкова // Физиология растений. 1983. -Т.32. — № 4.- С. 813−815.
  43. , А. Биотехнология и повышение продуктивности растений / А. Сассон v //Биотехнология свершения и надежды. -М.: Мир, 1987. — С. 150−164.
  44. , С. Л. Справочник по лекарственным растениям/ С. Л. Соколов, И. П. Замотаев. М.: Наука, 1990. -189 с.
  45. , В. Д. Выделительная функция высших растений. / В. Д. Рощина,
  46. B. В. Рощина.-М.: Наука. 1989. 214с.
  47. Albersheim, P. Oligosaccharins: naturally occurring carbohydrates with biological regionaly function / P. Albersheim, A. G. Darvill, M. Neil // Structure and functeon of plant genomes. N.Y.: Plenum press, 1983. P.293−312.
  48. Albersheim, P. Oligosaccharins that regulate growth, developments and defense responses in plant // Glycobiology. -1992. Vol 2.- № 3 P.181−198.
  49. Archambault, J. Production of indol alkaloids by surface immobilized
  50. C.roseus cells / J. Archambault, B. Volesky, W. Kurtz // Biochemical engineering research unit. Monreal. 1990. -Vol.35. — P.660−667.
  51. , M. (S)-tethrahydroprotoberberine oxidase the final enzyme in pro-toberberine biosynthesis / M. Amann, N. Nakagura, M. Zenk // Tetrahedron Lett. -1984. Vol.25. — № 9. — P. 953−954.
  52. Bailey, С. M. Catharanthus roseus L. Don. A model for the biosyntheth-sis of indol alkaloids by cell suspensions / С. M. Bailey, H. Nicholson, A. Stafford // Appl.YBiochem. Biotechnol.- 1986. -Vol 12. -№ 3 P. 215−227.
  53. Beecher, C. The incorporation of berberine into jattorthizine / C. Beecher W. J. Kelleher // Tetrahedron Lett. -1983. -Vol.24. № 5. P. 469- 472.
  54. Beck, C. Cell culture bioreactors/ C. Beck, P. Stifl // Chem. Eng, -1987.-T.21. P. 121−129.
  55. Bender, L. On the photosynthetic system and assimilate methabolism of Daucus and Arachis cell cultures / L. Bender, B. Pauler, К. H. Neumann // Primary and secondary methabolism of plant cell cultures. Bets.: Springer, 1985. — P. 2542.
  56. Biswas, G. Callus formation and plant regeneration from protoplasts derived from suspension culture of rise / G. Biswas, F. Zapata // Plant breed. 1990. — T.2. -P. 95−100.
  57. Breuling, M. Cultivation of cell cultures of Berberis wilsonae in 20−1 airlift bioreactors / M. Breuling, A. W. Alfermann, E. Reinhard // Plant Cell Reports. 1985. — Vol.4. — P. 220−223.
  58. Brodelius, P. Entrapment of plant cells in different matrices / P. Brodelius, K. Nilson // FEBS Left. 1985. — T.2.- P.312−316.
  59. Brodelius, P. Increasing secondary metabolic production in plant cell culture by redirecting transport / P. Brodelius, H. Pedersen // Trends in Biotechnology. -1993.-VoL.ll. № 1.- P. 30−36.
  60. Cabral, Q. M. Comparison of immobilisation metods for plant cells and protoplasts / Q. M. Cabral, P. Fevereiro // Current Sciene. 1985, T.7. — P. 335 336.
  61. Cadra, M. S. Plant cells, tissue and organ culture: potential sourses for plant secondary metabolites / M. S. Cadra, M. P. Heble // Proc. DAE Symp. Never Appr. Biol. Appl.- 1985.-P. 183−191.
  62. Chasan, R. Phytochemical Forecasting / R. Chasan // Plant Cell. -1994.- Vol.6 -.№ 1. P. 3−9.
  63. Cordell, G. A. Introduction to Alcaloids. / G. A. Corde. NewYork. 1981. -P. 118.
  64. Cosgrove, C. Biophlsical control of plant cell growth / C. Cosgrove // Ann. Rev. Plant Phisiol. -1985 .-№ 37.-P. 377- 405.
  65. Dalton, C.C. Produrt formation and plant cell specialization: A case of pho-tosynthetic development in plant cell cultures / С. C. Dalton, E. Peel // ProgrJndust. Microbiol. 1983. -Vol.17. — P. 109−166.
  66. Drapeau, D. Ajmalicln, serpentin and catharanthine accumulation in Catharanthus roseus bioreactor cultures / D. Drapeau, W. Harvey // Planta med.-1987. № 4. -P. 154−201.
  67. Fuller, K.V. Chemicals from plant cell cultures some biochemical and physiological pointers / K.V. Fuller // Chemistry and industry. — Oxford. 1984. Vol.23.-P.825−833.
  68. Fujiwara, H. Expression of (S)-scoulerine- 9-O-methyltransferase in Coptis japonica plants / H. Fujiwara, N. Takeshita, Y. Terano // Phytochem. -1993.-Vol.34.-P. 949−954.
  69. Furuya, T. Isolation of berberine from callus tissue of Coptis japonica / T. Furuya, K. Syono, A. Ikuta//Phitochem.-1972.-Vol.-P.175.
  70. Gray, D. Rapid grouwth in plant cell culture // Trend blotechnol. 1988.-T.10. -P.233−234.
  71. Gugler, K. Elisitor-induced tyrosine decarboxylase in berberine-synthesizing suspension cultures of Thalictrum rugosum / K. Gugler, C. Funk, P. Brodelius // Eur. J. Biochem. -1988. -Vol.170. P.661−666.
  72. Gulik, W. M. Growth of a Catharanthus roseus cell suspension culture in a modified chemostat under glucoselimiting conditions / W. M. Gulik, J. J. Meijer, H. J. Hoopen // Appl. Microbiol, and biotechnol. 1989. — Vol.30. -P. 270−275.
  73. Goodchild, J. Influence of ammonium and extra cellular pH on the amino and organic acid contents of suspension culture cell of Aser pseudoplatanus / J. Goodchild, C. Givan //Phisiol. Plant. 1990. — № 1. -P.29−37.
  74. Нага, M. Induction of a specific methyltransferase activity regulating by cytokinine in Thalictrum minus cell cultures/ M. Hara, S. Tanaka, M. Tabata // Phytochem. -1994. -Vol.36.-№.2. P.327−332.
  75. Hara, Y. Enhancement of berberine production in suspension cultures of Coptis japonica by gibberellic acid treatment / Y. Hara, T. Yoshioko, T. Morimoto // PlantPhysiol. 1988. — Vol.133. — P. 12−15.
  76. Kelleher, W.J. Enzymatic formation of protoberberine alkaloids/ W. J. Kelleher, A. Rother, E. Wellman // Planta Med. 1980. — Vol.40. -P. 127−136.
  77. Ketel, D. Inorganic nutriention of callus tissues of tagetes species: the effects on morphogenesis and accumulation of thiophenes and non-polar secondary methabolithes / D. Ketel // J. Plant physiol. 1986. — Vol.125. — № 1−2. — P.69−77.
  78. Matsubara, К. High density culture of Coptis japonica cells increases berberine production/ K. Matsubara, S. Kitani, T. Yoshioka// J. Chem. Tech. Bio-technol. -1989. -Vol.46.- P.61−68.
  79. Misawa, M. Production of useful metabolites by plant tissue culture/ M. Misawa//BiomassConvers. Technol. PrinsiplesandPract- 1887. P.193−199.
  80. Morimoto, T. Berberine production by cultured Coptis japonica cells in a one-stage culture usingmedium with a high cooper concentration / T. Morimoto, Y. Нага, Y. Kato // Agric. Biol. Chem. 1988. -Vol.2 — № 7. — P. 1830−1836.
  81. Morris, P. Regulation of product synthesis in cell culture of Catharanthus roseus. Ci'mparison of production media / P. Morris // Planta med. 1986. — № 2. -P.121−126
  82. Muller, M. The norcoclaurine pathway in operate in berberine biosynthesis in Coptis japonica / M. J. Muller, M. H. Zenk // Planta Med. 1992. -Vol.58. -№ 6.-P. 524−527.
  83. Nakagawa, K. Release and crystallization of berberine liquid medium of Thalictrum minus cell suspension cultures / K. Nakagawa, A. Konagai, H. Fukui // Plant Cell Reports. -1984. Vol.3. — P. 254−257.
  84. , Г. С. Новый способ получения культуры тканей высших растений / Г. С. Гутман, Г. А. Ширяева // Растительные ресурсы. -1980.- № 4.-С. 601−606.
  85. , Ф.Л. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений. / Ф. Л. Калинин, В. В. Сарнацкая, В. Е. Полшцук Киев: Наукова думка, 1980. -487 с.
  86. , Р.Г. Выращивание клеток растений в суспензионной культуре / Р. Г. Бутенко // Известия АН СССР, Серия биологическая. 1977.- № 5-С. 697−710.
  87. , Р. А. Изолирование и поддержание каллусных и суспензионных культур клеток / Р. А. Диксон // Биотехнология растений: культура клеток М.: Аг-ропромиздат, 1989,-С. 8−31.
  88. , Р. Г. Рост и дифференциация в культуре клеток растений / Р. Г. Бутенко // Рост растений и природные регуляторы. — М.: Наука, 1977.-С. 697−710.
  89. , Т. С. Технология изолированных культур для микроразмножения лесных древесных растений / Т. С. Момот // Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда: тез. докл. 7-ой междунар. конф. М.: Наущц 1997. — С. 441−442
  90. , Р. Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнология на их основе. / Р. Г. Бутенко. М.: ФБК-ПРЕСС, 1999. — 160 с.
  91. , Н. В. Декоративное садоводство / Н. В. Агафонов. -М.: Колос, 2000.-320 с.
  92. , Т. В. Химия древесины / Т. В. Рязанова, Н. А. Чупро-ва, Е. В. Исаева. Красноярск: КГТА, 1996. — 358 с.
  93. , Л. Н. Химический анализ лекарственных растений / Н. И. Гринкевич, Л. Н. Сафронич. М.: Высш. шк., 1983. — 175 с.
  94. Г. В. Практические работы по химии природных соединений. / Г. В. Лазуревский, И. В. Тереньтьева, А. А. Шамшурин. М.: Высш. Шк., 1966.-335 с.
  95. , К. Б. Определение флавоноидов в растительном сырье / К. Б. Адихотдаев, А. И. Баньковский, В. И. Глызин // Фармация. — 1977. -№ 3.- С. 3−27.
  96. , Л. Б. Определение тритерпеновых сапонинов в порошке и таблетках «сапарал » / Л. Б. Мальчуковский, Н. И. Либизов // Фармация. 1971. — № 2. — С. 68−71.
  97. , В. А. Методы определения витаминов/
  98. B. А. Девяткина. -М.: Пищепромиздат, 1954. — 135 с.
  99. , С. А. Скрининг физиологически активных веществ /
  100. C. А. Нижний, Н. В. Дмитриева. -М.: Медицина, 1985. 158 с.
  101. , Э. Д. Современные физиолого-химические методы исследования : метод, указ. к проведению лаб. работ для студентов спец. 2603 всех форм обучения. / Э. Д. Левин, П. В. Миронов. Красноярск: СТИ, 1988.-28 с.
  102. , М. Техника липидологии / М. Кейтс. М.: Наука, 1975. — 322 с.
  103. , Л. В. Практические работы по химии древесины и целлюлозы / Л. В. Оболенская. М.: Наука, 1965. — 111 с.
  104. , В.М. Основы научных исследований / В. М. Ушанова, О. И. Лебедева. Красноярск, 2003.- кн.2 — 98 с.
  105. , В. Л. Биохимия растений / В. Л. Кретович. М.: Высш. шк., 1986.-С. 356−357.
  106. , В. Г. Практические работы по химии природных соединений. / В. Г. Лазуревский, И. В. Терентьева, А. А. Шамшурин. — М.: Высш. шк., 1966. 335 с.
  107. , В. И. Практикум по электрохимическим методам анализа. / В. И. Гороховская, В. М. Гороховский. М.: Мир, 1987. — 191 с.
  108. , В.А. Технология научных исследований — методы, модели, оценки: Учеб. пособие. 2-е изд. стереотипное / В. А. Гоберман, Л. А. Гоберман.- М.: МГУЛ, 2002. 390 с.
  109. Gamborg, О. L. Plant cell, tissue, and organ culture: fundamental methods / O. L. Gamborg, G. C. Phillips. Berlin: Springer-Verlag, 1995. -557 p.
  110. , Г. П. Биотехнология растений: культура клеток. / Г. П. Болвелл. М.: Агропромиздат, 1989. — 280 с.
  111. , Р. Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнология на их основе / Р. Г. Бутенко. М.: ФБК-ПРЕСС, 1999. — 160 с.
  112. , В. А. Технология научных исследований методы, модели, оценки : учеб. пособие / В. А. Гоберман, JI. А. Гоберман. — М.: МГУЛ, 2002. — 390 с.
  113. , Е. А. Получение посадочного материала древесных, цветочных и травянистых растений с использованием методов клеточной и генной инженерии. / Е. А. Калашникова.- М.: МГУЛ, 2001.- 73 с.
  114. , А. Биотехнология и повышение продуктивности растений / А. Сассон. -М.: Мир, 1987. С. 150−164.
  115. , Г. С. Основы химической регуляции роста и продуктивности растений / Г. С. Муромцев, Д. И. Чекаников, К. 3. Гамбург М.: Агропром-издаг, 1987.-С. 316−322.
Заполнить форму текущей работой

Сдать сессию!