Серологические реакции, компоненты, учет результатов

1. РИФ — реакция иммунофлюорисценции.

Компоненты : АГ + АТ меченные флюорохромом. Дают контакт 30 минут при 37 С, затем производят тщательный отмыв в физрастворе. Учет результатов реакции осуществляется с помощью люминесцентного микроскопа, в оптическую систему которого устанавливается набор светофильтров, обеспечивающих освещение препарата ультрафиолетовым или сине-фиолетовым светом с заданной длинной волны. Это заставляет флюорохром светиться в заданном диапазоне спектра. Исследователь оценивает характер свечения, форму, размер объектов и их взаимное расположение.

2. ИФА — иммуно-ферментный анализ.

Компонент: АГ + АТ с ферментом. Учет результатов: Контакт, отмыв, затем добавляют субстрат, который при контакте с АТ-ферментным комплексом дает цветную реакцию.

3. РСК — реакция связывания комплемента.

Компонент: АГ + АТ + комплемент. Контакт. Затем добавляют гем-систему (гемолизин + эритроциты барана). Учет результатов:. Если гемолиза не происходит, значит АГ и АТ связали комплемент. Задержка гемолиза — реакция положительная. Если произошел гемолиз, значит комплемент связан гем-системой — реакция отрицательная.

4. РДП — реакция диффузной преципитиции.

Компонент: АГ + АТ (диффузия в агаровом геле). Учет результатов — образование контура преципитации.

5. РНГА — реакция непрямой гемаглютинации.

Компонент: Эритроциты нагружают АГ и при образовании комплекса АГ-АТ происходит Учет результата: агглютинация эритроцитов.

6. РТГА — реакция торможения гамаглютинации.

Компонентами реакции: являются неизвестные антигены (вирусодержащий материал), который может быть обогащен пассажами в культуре клеток, лабораторных животных или курином эмбрионе, специфические иммунные противовирусные (или против отдельных вирусных антигенов) сыворотки, эритроциты. Для разведения компонентов реакции используют забуфференный физраствор (рН 7,2−7,4). Эритроциты получают из крови птиц (куры, гуси), млекопитающих (гвинейские свинки), человека (0 группа). Их трижды промывают в стерильном физрастворе и хранят в виде 0,5−1,0% суспензии. С целью их стабилизации эритроциты предварительно обрабатывают формалином или глутаровым или акриловым альдегидом. Учет результатов: Реакцию считают позитивной при отсутствии агглютинации эритроцитов.

7. РТГАд — реакция торможения гемадсорбции.

Компонентами реакции являются вирусы, способные к гемадсорбции, культура клеток, в которой они развиваются, противовирусная сыворотка с разведением 1:10 и больше, 0,4₁, 0% завись эритроцитов петуха, гвинейской свинки или человека, трижды отмытая физраствором или раствором Хенкса. Оценить результаты реакции можно также непосредственно измеряя значение рН среды с помощью иономера. Цветную пробу особенно часто используют для лабораторной диагностики полиомиелита.

Надежным методом идентификации вирусов является реакция нейтрализации бляшкообразования вирусов в культурах клеток. Принцип реакции заключается в том, что антитела специфической иммунной сыворотки, которые нейтрализуют вирусы, способствуют уменьшению числа бляшек — зон некрозов — в однослойной культуре клеток.

8. РН — реакция нейтрализации.

Компонент: Вирус + АТ. Контакт. Ввод в чувствительную к вирусу систему. Учет результатов— нейтрализация инфекционной активности вируса.