Материалы и методы

В качестве источника ВБИ были взяты семена овса (всхожесть 99%), -облученные от источника 60Со на установке ГУБЭ в дозе 10 Гр при мощности дозы 1.8 Гр/мин. Сразу после облучения они засыпались в плексигласовую клетку для мышей (20×10 см) в количестве достаточном для покрытия всего дна клетки зерном слоем 2 см. В каждую клетку помещали по 10 мышей линии BF 2-месячного возраста, массой 18−20 г. Мыши находились в постоянном соприкосновении с облученными семенами и, следовательно, непрерывно подвергались непрерывному действию ВБИ. В течение суток мыши питались только этим зерном, затем зерно заменялось свежей порцией облученных семян. Через неделю такого непрерывного облучения ВБИ часть мышей облучалась выявляющей дозой (ВД) 1.5 Гр при мощности дозы 1 Гр/мин. В качестве контроля служили мыши, помещенные в те же условия, только с необлученными семенами, сменяемые через сутки.

Плотноионизирующим излучением в наших экспериментах являлось поток пи-мезонов и вторичное излучение от протонов с энергией 70 ГэВ (ВИП), генерируемые на Серпуховском ускорителе заряженных частиц в г. Протвино. ВИП состоит из частиц разных сортов: протонов, нейтронов, пионов, мезонов, обладающих максимумом энергии 70 ГэВ. Спектр ВИП в значительной степени соответствует спектру частиц космического излучения, что позволяет в наземных условиях моделировать воздействие космических лучей на биологические объекты [21]. Диапазон ЛПЭ этих частиц составляет 0.2 — 500 КэВ/мкм. Облучение мышей проводилось в биологическом канале ускорителя. Дозиметрия осуществлялась с помощью тканеэквивалентной камеры, стационарно установленной в пучке, и с помощью радиотермолюминесцентных дозиметров ИКС. Погрешность измерений не превышала 10%.

В этих экспериментах использовались самцы мышей линии SHK 2-х месячного возраста, которые после облучения адаптирующей дозой (АД) 10 сГр ВИП или пи-мезонов через сутки облучались ВД, равной 1.5 Гр, илилучами от источника 60Со на установке ГУБЭ или в эквивалентной дозе ВИП, равной 0.5 Гр, так как ранее нами было показано, что относительная биологическая эффективность ВИП в этом диапазоне доз равнялась 3 [22].

В качестве положительного контроля одновременно были проведены эксперименты по индукции РАО приоблучении мышей в адаптирующей дозе10 сГр, при мощности дозы 0.125 Гр/мин, и выявляющей — 1,5 Гр, при мощности дозы 1 Гр/мин. Во всех экспериментах через 28 ч после облучения АД или ВД мышей забивали методом цервикальной дислокации.

Процедуру приготовления препаратов костного мозга для подсчета микроядер (МЯ) в полихроматофильных эритроцитах (ПХЭ) проводили по стандартной методике с некоторыми модификациями [23]. Микроядерный метод в отличие от хромосомного анализа позволяет оценить генотоксичность малых доз различных воздействий по всему клеточному циклу и является в настоящее время основной тест-системой при оценке мутагенных факторов окружающей среды. На каждую экспериментальную точку брали не менее 5 животных и подсчитывали примерно 10 000 ПХЭ. Варьирование средних значений оценивали по величине стандартной ошибки, а статистическую достоверность различий между группами — по критерию Стьюдента.