Методы забора проб кожного экскрета

Кожный экскрет, как известно, является одной из важнейших биологических сред. Наряду с такими биологическими жидкостями, как кровь, лимфа, моча, слюна, кожный экскрет может служить надежным инструментом для выявления физиологического состояния организма человека в норме и при патологии. Следует, однако, отметить, что для решения указанных выше задач чаще всего используются данные анализа крови или мочи, а экскретируемая кожей жидкость неоправданно оказывается без должного внимания со стороны исследователей. Причиной такого положения служит не только факт недооценки роли кожного экскрета в выявлении особенностей функционирования организма, но и недостаточно разработанные методы забора проб экскрета с поверхности кожи и его анализа.

Поэтому целью нашего исследования явилась разработка простых и удобных методов взятия проб экскрета с поверхности кожи. Для этого мы предлагаем несколько таких методов, каждый из которых по-своему удобен в техническом исполнении и может быть применен в биохимическом анализе.

Один из таких методов основан на использовании полосок фильтровальной бумаги, которые прикладываются на определенные участки кожи тела человека. Эти полоски могут быть приготовлены из обычной фильтровальной бумаги или из хроматографической бумаги. В последнем случае результаты более достоверны, так как состав и толщина хроматографической бумаги в любых ее участках одинаковы. Полоски должны быть строго определенного размера, что необходимо для расчета площади экскретируемой поверхности. Размеры полосок могут быть различными, но данные эксперимента показывают, что наиболее оптимальные их размеры 1×6 см2 или 2×4 см2. Для забора жидкости с поверхности кожи выбирают открытые участки тела. Таковыми могут быть, например, участки кожи ладони, лба, шеи. При этом полоски фильтровальной (или хроматографической) бумаги смачивают растворителем. В зависимости от природы определяемого вещества в кожном экскрете в качестве растворителей могут применяться как неорганические, так и органические растворители. Поскольку многие вещества способны легко проникать через кожные покровы, растворитель должен быть, прежде всего, безвредным для организма. Чаще всего это вода и этиловый спирт, а в некоторых случаях рекомендуем использовать смеси этанола с хлороформом (соотношения 10:1, 5:1, 3:1 соответственно). Такие смеси легко растворяют даже жироподобные вещества и могут быть рекомендованы для их экстракции из кожных выделений.

Полоски бумаги, смоченные растворителем, накладываются на поверхность кожи с помощью пинцета и выдерживаются до подсыхания. Затем в них с помощью тех или иных методов определяются интересующие исследователя метаболиты. Указанный метод позволяет произвести забор кожного экскрета с любого участка поверхности кожи.

Другой предлагаемый нами метод забора кожного экскрета менее универсален, но также прост в исполнении. Он позволяет получить смыв с поверхности кожи фалангов пальцев. Для этого в небольшой химический стакан наливают точно отмеренный объем воды (или какого-либо другого растворителя) и опускают туда одну-две фаланги пальцев на 2−3 мин. Затем во взятом кожном экскрете делают аналитические определения. При этом площадь фалангов пальцев предлагаем определять таким образом: поскольку разверткой пальца является трапеция, а ее площадь, как известно, равна произведению длины средней линии на высоту, то и площадь экстрагируемой поверхности пальца вычисляется как произведение длины окружности средней части пальца на длину погруженной в растворитель фаланги пальца.

Наконец предлагаем еще один метод, позволяющий произвести забор проб кожного экскрета с вогнутой поверхности кожи. С помощью пипетки (вместо пипетки можно использовать обычный шприц) наливают строго отмеренный объем растворителя на вогнутую кожную поверхность (например, на ладонь), выдерживают 2−3 мин., затем той же пипеткой переносят жидкую смесь в химический стакан и определяют в ней те или иные метаболиты.

Таким образом, предложены простые и удобные методы забора проб кожного экскрета, которые можно рекомендовать для аналитического определения веществ, содержащихся в кожных выделениях.