Биохимические признаки штамма 839

Установлено, что моносахариды гидролизатов клеточной стенки штамма 839 представлены маннозой, ксилозой, рибозой и рамнозой, а также двумя не идентифицированными сахарами (табл. 2).

Как видно из представленных данных, арабиноза и ксилоза — сахара, характерные для актиномицетов из группы актиноплан, у штамма 839 отсутствуют [10, 19, 20] и, следовательно, по этому признаку выделенный нами штамм не может быть отнесен к группе актиноплан.

Поскольку присутствие диаминопимелиновой кислоты в составе клеточной стенки является стабильным и дополнительным признаком для характеристики актиномицетов, нами изучено наличие этой кислоты у штамма 839 в сравнении с типовыми культурами из рода стрептомицетов (S. griseus) и рода актиноплан (A. Philippiensis).

Таблица 2 — Значения Rf диагностических сахаров клеточной стенки штамма 839.

Методом бумажной хроматографии в гидролизатах клеточной стенки шт. 839 выявлено наличие диаминопимелиновой кислоты в LL-форме (LL-ДАПК). Значения Rf диаминопимелиновых кислот в составе клеточных стенок шт. 839 в сравнении с контрольными культурами из группы стрептомицетов (S. griseus) и актиноплан (Actinoplanes philippiensis) представлены в таблице 3. Как видно из представленных данных, в клеточной стенке штамма 839 диаминопимелиновая кислота присутствует в LL-форме, как у типовой культуры S. griseus.

Таблица 3 — Значения Rf диаминопимелиновой кислоты, входящей в состав клеточной стенки шт. 839 и контрольных культур

Таким образом, по биохимическим характеристикам, а именно по составу компонентов клеточной стенки (составу диагностических сахаров и форме диаминопимелиновой кислоты) согласно классификации Лешевалье штамм 839 отнесен к I хемотипу [10].

Суммируя данные морфологических признаков — наличие одновременно конидеоспор и спорангиев, подвижных зооспор, а также хемотаксономической характеристики культуры, а именно — принадлежность по составу клеточной стенки к I хемотипу, штамм 839, выделенный из почвенного образца как продуцент ингибитора б-глюкозидаз, может быть отнесен к роду Kitasatoa, ранее, согласно определителю Берджи, входящему в семейство Actinoplanaceae [17].

Согласно последнему 9-му определителю бактерий Берджи, род Kitasatoa перенесен из семейства Actinoplanaceae в группу «Стрептомицеты и близкие роды» и трансформирован в род Streptomyces [18].

Следует только отметить, что антидиабетическое средство, используемое в настоящее время в медицинской практике акарбоза (глюкобай) является продуктом жизнедеятельности актиномицета из группы актиноплан рода Actinoplanes. Видовая его принадлежность не установлена. Культуры этого рода образуют спорангии с подвижными спорами, клеточная стенка содержит мезо-ДАПК, и в гидролизатах целых клеток присутствуют ксилоза и арабиноза [18]. По набору этих признаков продуцент Акарбозы Actinoplanes шт. SE 50/110 относится к IV хемотипу.

Таким образом, на основании морфолого-культуральных и биохимических признаков штамма 839, выделенный из почвенного образца как продуцент ингибитора б-глюкозидаз, значительно отличается от продуцента Акарбозы и является новым продуцентом.

Штамм 839 получил название Streptomyces species, ему присвоен коллекционный номер 1328-Д, все дальнейшие исследования по разработке отечественного антидиабетического средства проводили с этой культурой.